Les dades de densitometria generades per a Western blots s'utilitzen habitualment per comparar l'abundància de proteïnes entre mostres. … Es van observar dades de densitometria no lineal quan es van detectar taques occidentals mitjançant fluorescència infraroja o quimioluminescència, i en diferents condicions SDS-PAGE.
Què és l'anàlisi densitometria?
La densitometria és la mesura quantitativa de la densitat òptica en materials sensibles a la llum, com ara paper fotogràfic o pel·lícula fotogràfica, a causa de l'exposició a la llum.
Com s'utilitza la densitometria a la imatge J?
Densitometria amb ImageJ
- Feu clic al centre del quadrat i arrossegueu-lo al carril següent. …
- Per a l'últim carril, repetiu el procediment però premeu Ctrl i 3 per configurar l'últim carril. …
- Utilitzeu l'eina de línies per dibuixar les línies per eliminar el fons del carril dels càlculs. …
- Vés a: Anàlisi→Gels→Etiqueta pics per obtenir l'informe.
Com analitzeu els resultats de Western blot?
Valideu les vostres eines de quantificació . Per exemple, executeu una taca on els carrils estiguin carregats amb 20 µg, 15 µg i 10 µg de proteïna total. Després de l'anàlisi, la quantificació relativa de les bandes objectiu hauria de ser 2, 1,5 i 1. Proveu diferents eines de quantificació i configuracions fins que pugueu reproduir de manera fiable els resultats correctes.
Com quantifiqueu un western blot?
Pas 1: determineu el fons restantdensitats de la proteïna d'interès (PI) i el control normalitzador (NC). Pas 2: Identifiqueu el NC que té el valor de densitat més alt. Pas 3: divideix tots els valors NC pel valor de densitat NC més alt per obtenir un valor NC relatiu.
