Els anticossos de control de càrrega són controls importants, ja que indiquen la càrrega igual de mostres a tots els pous. Els controls de càrrega també indiquen la transferència adequada de proteïnes a la membrana durant el procés de western blotting. Els controls de càrrega solen ser proteïnes amb una expressió alta i omnipresent.
Què fa un control de càrrega?
Un control de càrrega és una proteïna que s'utilitza com a control en un experiment de Western Blotting. … S'utilitzen per assegurar-se que la proteïna s'ha carregat per igual a tots els pous.
Per què fem servir un control de càrrega a Western blot?
Els controls de càrrega tenen un segon paper com a control en els western blots. Es poden utilitzar per comprovar que hi ha hagut una transferència uniforme del gel a la membrana a través de tot el gel. Això és imprescindible quan es fan comparacions dels nivells d'expressió de proteïnes entre mostres.
Com s'utilitza el control de càrrega a Western blot?
Els senyals dels controls de càrrega s'utilitzen normalment per normalitzar els senyals de les proteïnes d'interès. Per utilitzar un control de càrrega per a aquests propòsits, la detecció amb l'anticossos de proteïna de control i l'anticòs experimental s'han de fer a la mateixa taca. S'utilitzen una varietat de proteïnes diferents com a controls de càrrega.
Per què s'utilitza l'actina com a control de càrrega?
Beta-actina, normalment s'utilitza com a control de càrrega per a Western Blot pernormalitzar els nivells de proteïnes detectats confirmant que la càrrega de proteïnes és la mateixa al gel.