Incuba el recipient a una habitació temperada durant 2-3 minuts . Les cèl·lules fermament adherides es poden separar ràpidament a 37 °C. Observa les cèl·lules al microscopi. Les cèl·lules desprengudes semblen arrodonides i refractils al microscopi.
Què passa si Trypsinizes les cel·les massa temps?
Incubar cèl·lules amb una concentració de tripsina massa alta durant un període de temps massa llarg danyarà les membranes cel·lulars i matarà les cèl·lules. Si no esteu segur de la concentració de tripsina a utilitzar, feu servir una concentració baixa.
Com es poden tripsinitzar les cèl·lules?
Les cèl·lules es poden tornar a suspendre amb pipetant suaument la suspensió cel·lular per trencar els grups. Es pot fer una dilució addicional, si cal, per al recompte de cèl·lules i/o el subcultiu.
Quant de temps triguen a connectar-se les cel·les?
les primeres cel·les ja s'adjunten després de 3-5 min! Segons la meva experiència, la majoria dels EC es van connectar després de 10-20 minuts. Però com més espereu, més ferm és el fitxer adjunt.
És dolent tripsinitzar cèl·lules dos dies seguits?
Sí, és perjudicial si estàs tripsinitzant les teves cèl·lules contínuament després de 24 hores de divisió. És recomanable fer la divisió després de 48 hores de divisió. … Podeu mantenir les cèl·lules fins que la morfologia sigui bona (Depèn del vostre tipus de cèl·lula, algunes cèl·lules poden arribar a 80 passatges i altres fins a 10).
