El producte de la digestió de restricció es pot emmagatzemar fàcilment a -20 °C. A 4 °C estaria bé, però per assegurar-se que no hi hagi activitat ni activitat estrella, és es recomana mantenir-lo a -20 C.
Com emmagatzemeu l'ADN digerit?
Proveu emmagatzemar la rodanxa de gel a la nevera durant la nit, o fins i tot fondre la rodanxa en un tampó i congelar-la a -20 °C o -80 °C. La degradació de l'ADN es produirà a la mateixa velocitat i en les mateixes condicions que l'ADN soluble, així que utilitzeu una temperatura més freda per a un emmagatzematge més llarg.
Què significa que un plasmidi sigui digerit?
El DNA plasmidi purificat es digereix amb 1 o més enzims de restricció (REs) seleccionats per donar un patró de bandes d'ADN diferent que es resol fàcilment mitjançant electroforesi. … Normalment es seleccionen enzims de restricció que tallen el lloc de clonació múltiple (MCS) i donen lloc a un patró de diagnòstic de 2-5 bandes fàcils de resoldre.
Com emmagatzemen els plasmidis lineals?
Si us preocupen els efectes aigües avall de TE, emmagatzemeu l'ADN a una concentració més alta i diluïu-lo quan sigui necessari, o utilitzeu "TE baix", que és 10 mM Tris / EDTA 0,1 mM. quan l'ADN o l'ARN està net, es pot emmagatzemar a -20ºC durant molts mesos sense cap degradació.
Quant de temps pots mantenir el resum de restriccions?
Pro-Tip Depenent de l'aplicació i de la quantitat d'ADN a la reacció, el temps d'incubació pot anar des de 45 minuts fins a tota la nit. Per als resums de diagnòstic, 1-2 hores éssovint suficient. Per als digerits amb >1 µg d'ADN utilitzats per a la clonació, es recomana digerir durant almenys 4 hores.
