No obstant això, quan els espectres d'emissió es superposen, es pot detectar fluorescència de més d'un fluorocrom. Per corregir aquesta superposició espectral, s'utilitza un procés de compensació de fluorescència. Això garanteix que la fluorescència detectada en un detector concret deriva del fluorocrom que s'està mesurant.
Per què necessitem una compensació en citometria de flux?
Es requereix una compensació per a un experiment de citometria de flux a causa de la física de la fluorescència. Un fluorocrom s'excita i emet un fotó en un rang de longituds d'ona. Alguns d'aquests fotons s'aboquen a un segon detector, cosa que fa que les mostres tenyides semblin doble positives.
Quin és l'objectiu principal d'utilitzar una cèl·lula compensadora?
L'objectiu principal és permetre la mesura de la fluorescència real al canal primari contaminat pel vessament dels fluoròfors veïns. Per tant, la compensació corregeix la "intrusió" de fluorescència entre fluoròfors. Tanmateix, no és perfecte i no pot solucionar tots els efectes no desitjats.
Què és la matriu de compensació?
Una matriu de compensació es calcula mitjançant fitxers de control fluorescent d'un sol color que es recullen a ImageStream o FlowSight amb tots els canals recollits i en absència d'il·luminació de camp clar o SSC.
Què és la compensació espectral?
Usant espectralLa compensació significa que el senyal de detectors no primaris encara s'utilitza per millorar el senyal real dels marcadors sempre que sigui possible. Les mostres de control primaris s'utilitzen per nomenar els paràmetres. … Les mostres utilitzades per als detectors primaris també ajuden a anomenar aquests paràmetres després de la compensació espectral.
